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该片继续上集的故事主线，讲述了一个职业刺客——代号“黑蛇”的新娘（乌玛·瑟曼饰）——杀死仇敌的复仇传说。 　　血溅婚礼，致命毒蛇暗杀小组的老板比尔带着其他几名职业杀手残忍的杀死所有参加婚礼的宾客之后，拂袖而去，留下被射杀而陷入昏迷的新娘。四年后，已经成为植物人的新娘意外的在医院苏醒，开始了她周密而残酷的千里追杀。上集中杀死前伙伴“水腹蛇”和“眼镜蛇”之后，新娘的死亡名单上已经只剩下三人——“加州山蛇”、巴德和比尔。在一环套一环的追杀套索末端，等待“黑蛇”的将是她的终极任务之宿命决斗——“杀死比尔。前特种部队士兵萨拉（让娜·古尔索饰）的小儿子在参观美国驻法兰克福领事馆时失踪得无影无踪。更奇怪的是，似乎没有人记得他曾经来过这栋大楼。萨拉知道德国当局在领事馆内没有管辖权，如果她现在被迫离开，可能就再也见不到儿子了。萨拉深入领事馆的迷宫，拼命寻找她的儿子，却没有意识到周围黑暗阴谋所带来的危险逐渐逼近。。